摘要：全自動(dòng)樣品組織研磨儀對(duì)水稻葉片的研磨實(shí)驗(yàn)主要目的便是為了滿足分子標(biāo)記輔助育種中基因型鑒定、基因克隆、測(cè)序的需要，而此次實(shí)驗(yàn)借用棉簽等具吸附功能的材料代替移液器，依次直接在2種樣品DNA提取液中進(jìn)行操作，建立了一種簡(jiǎn)單、快速、環(huán)保的水稻葉片DNA提取方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，提取溶液通過PCR擴(kuò)增，可滿足基因擴(kuò)增對(duì)模板的要求。 同時(shí)，對(duì)其進(jìn)行了靈敏度測(cè)試，稀釋107倍仍然能夠擴(kuò)增出目標(biāo)片段；然后再通過PCR、克隆載體連接等分子生物學(xué)手段，驗(yàn)證此方法也滿足測(cè)序的需要。本方法能夠在90s內(nèi)完成植物葉片DNA的提取，解決了目前植物基因組DNA提取方法需要離心機(jī)等昂貴特殊設(shè)備、提取步驟繁鎖、提取過程中刺激味大、提取時(shí)間長(zhǎng)等問題，有利于大規(guī)模開展分子標(biāo)記輔助育種中材料基因型的鑒定，具有簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簲M測(cè)試全自動(dòng)樣品組織研磨儀對(duì)水稻葉片研磨效果 1.測(cè)試對(duì)象：上海凈信全自動(dòng)樣品快速研磨機(jī)，型號(hào)為JXFSTPRP-24L 2.工作原理：樣品（水稻葉片）放入離心管中，放入磨球，通過研磨設(shè)備的高速上下振蕩帶動(dòng)球磨珠進(jìn)行粉碎樣品。 
水稻葉片樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)步驟： 1、需要提前備好凈信組織研磨儀主機(jī)，水稻葉片若干，離心管和不銹鋼球磨珠幾顆，提取試劑 2、需要把樣品水稻葉片用剪刀剪切成小塊狀，然后放入樣品離心管內(nèi)，再加入適量的氧化鋯珠和相應(yīng)提取試劑在離心管內(nèi) 3、把離心管放入機(jī)器適配器中，但要注意適配器的配平緊固，然后再鎖蓋 4、根據(jù)樣品水稻葉片的實(shí)驗(yàn)需求去設(shè)置儀器設(shè)備的研磨頻率及時(shí)間 5、啟動(dòng)設(shè)備，開啟樣品的程序運(yùn)轉(zhuǎn)，待程序停止運(yùn)轉(zhuǎn)，便可獲得完成磨碎后的樣品 水稻葉片樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)效果： 
實(shí)驗(yàn)注意：在應(yīng)用全自動(dòng)組織研磨儀對(duì)水稻葉片開展前處理實(shí)驗(yàn)研磨時(shí)，要盡可能的去添加一些提取試劑，讓樣品可以在前處理過程中因有液體的情況下可使樣品的研磨效果更加充分。 |
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